Atšķirība starp afinitāti un jonu apmaiņas hromatogrāfiju

galvenā atšķirība starp afinitātes un jonu apmaiņas hromatogrāfiju ir tā mēs varam izmantot afinitātes hromatogrāfiju, lai atdalītu maisījumā lādētas vai neuzlādētas sastāvdaļas, turpretī mēs varam izmantot jonu apmaiņas hromatogrāfiju, lai atdalītu maisījumā lādētus komponentus.

Hromatogrāfija ir tehnika, kuru mēs varam izmantot, lai maisījumā atdalītu vēlamos komponentus. Ir dažādi veidi, piemēram, šķidruma hromatogrāfija, gāzu hromatogrāfija utt. Afinitātes hromatogrāfija un jonu apmaiņas hromatogrāfija ir divas šķidruma hromatogrāfijas apakškategorijas. Šajos paņēmienos ir arī divas fāzes. Proti, tās ir stacionārā un mobilā fāze. Šo paņēmienu mērķis ir mobilā fāzes komponentus atdalīt atkarībā no sastāvdaļu piesaistes pie nekustīgās fāzes virsmas..

SATURS

1. Pārskats un galvenās atšķirības
2. Kas ir afinitātes hromatogrāfija
3. Kas ir jonu apmaiņas hromatogrāfija
4. Salīdzinājums blakus - afinitātes un jonu apmaiņas hromatogrāfija tabulas formā
5. Kopsavilkums

Kas ir afinitātes hromatogrāfija?

Afinitātes hromatogrāfija ir bioķīmiska metode, kuru mēs izmantojam, lai maisījumā atdalītu komponentus atkarībā no šo sastāvdaļu mijiedarbības.

Mijiedarbībās, kuras mēs izmantojam šajā gadījumā, ir šādas:

1. Antigēna un antivielu mijiedarbība
2. Fermentu un substrātu mijiedarbība
3. Receptoru un ligandu mijiedarbība
4. Olbaltumvielu un nukleīnskābju mijiedarbība

Šajā tehnikā šai atdalīšanas metodei mēs izmantojam molekulu molekulārās īpašības. Šeit mēs ļaujam vēlamajam savienojumam mijiedarboties ar stacionāru fāzi, izmantojot ūdeņraža saites, jonu mijiedarbību, disulfīdu tiltus, hidrofobisko mijiedarbību utt. Vispirms molekulas, kas nav mijiedarbojas ar stacionāro fāzi. Tādējādi mēs to varam atdalīt no maisījuma. Vēlamais savienojums paliks pievienots stacionārai fāzei. Tāpēc mēs to varam atdalīt, izmantojot eluējošu šķīdinātāju, un padarīt to eluētu, lai to atdalītu arī.

01. attēls. Hromatogrāfijas kolonna

Afinitātes hromatogrāfija ir noderīga, attīrot un koncentrējot vielu no maisījuma, izmantojot buferšķīdumu. Tas ir arī noderīgi, lai samazinātu nevēlamās vielas maisījumā. Apsverot aparātu, kuru mēs izmantojam šim procesam, mums vajadzētu izmantot kolonnu, kas piepildīta ar mūsu stacionāro fāzi. Pēc tam mums vajadzētu ielādēt mobilo fāzi, kurā ir biomolekulas, kuras mēs atdalīsim. Pēc tam ļaujiet tām sasaistīties ar stacionāro fāzi. Pēc tam, izmantojot mazgāšanas buferi, mēs varam atdalīt nemērķa biomolekulas, bet mērķa molekulām jābūt ar augstu afinitāti pret stacionāro fāzi, lai panāktu atdalīšanas procesu.

Kas ir jonu apmaiņas hromatogrāfija?

Jonu hromatogrāfija ir šķidruma hromatogrāfijas forma, kurā mēs varam analizēt jonu vielas. Bieži vien mēs to izmantojam, lai analizētu neorganiskos anjonus un katjonus (t.i., hlorīdu un nitrātu anjonus un kālija, nātrija katjonus). Lai arī tas ir retāk sastopams, mēs varam analizēt arī organiskos jonus. Turklāt mēs varam izmantot šo paņēmienu olbaltumvielu attīrīšanai, jo olbaltumvielas ir uzlādētas molekulas ar noteiktām pH vērtībām. Šeit mēs izmantojam cietu stacionāru fāzi, pie kuras var piestiprināt uzlādētās daļiņas. Piemēram, kā cieto balstu mēs varam izmantot sveķu polistirola-divinilbenzola kopolimērus.

02 attēls: jonu apmaiņas hromatogrāfijas fāzes

Lai izskaidrotu to tālāk, stacionārajā fāzē ir fiksēti joni, piemēram, sulfātu anijoni vai kvartāra amīna katjoni. Katram no tiem vajadzētu asociēties ar pretionu (jonu ar pretēju lādiņu), ja mēs vēlamies saglabāt šīs sistēmas neitralitāti. Šeit, ja pretjons ir katjons, tad mēs sistēmu nosauksim par katjonu apmaiņas sveķiem. Bet, ja pretjons ir anjons, sistēma ir anjonu apmaiņas sveķi.

Jonu apmaiņas procesā ir piecas galvenās fāzes;

1. Sākuma posms
2. Mērķa adsorbcija
3. Eluācijas sākšana
4. Eluācijas beigas
5. Reģenerācija

Kāda ir atšķirība starp afinitāti un jonu apmaiņas hromatogrāfiju?

Afinitātes hromatogrāfija ir bioķīmiska metode, kuru mēs izmantojam, lai atdalītu komponentus maisījumā atkarībā no šo komponentu mijiedarbības, turpretī jonu hromatogrāfija ir šķidruma hromatogrāfijas forma, kurā mēs varam analizēt jonu vielas. Tāpēc galvenā atšķirība starp afinitātes un jonu apmaiņas hromatogrāfiju ir tā, ka jonu apmaiņas hromatogrāfiju mēs varam izmantot tikai jonu vielu atdalīšanai, savukārt afinitātes hromatogrāfija spēj atdalīt gan lādētas, gan neuzlādētas daļiņas. Apsverot darba principu, atšķirība starp afinitāti un jonu apmaiņas hromatogrāfiju ir tāda, ka afinitātes hromatogrāfija notiek tāpēc, ka mērķa molekulām ir augsta afinitāte pret stacionāro fāzi. Tomēr jonu apmaiņas hromatogrāfijai mērķa molekulām ir pretējs lādiņš nekā stacionārās fāzes virsmai.

Zemāk esošajā infografikā ir salīdzināta afinitātes un jonu apmaiņas hromatogrāfija.

Kopsavilkums - afinitātes un jonu apmaiņas hromatogrāfija

Rezumējot, afinitātes un jonu apmaiņas hromatogrāfija ir divu veidu šķidruma hromatogrāfijas metodes. Galvenā atšķirība starp afinitātes un jonu apmaiņas hromatogrāfiju ir tā, ka mēs varam izmantot afinitātes hromatogrāfiju, lai atdalītu maisījumā lādētas vai neuzlādētas sastāvdaļas, turpretī jonu apmaiņas hromatogrāfiju var izmantot, lai atdalītu maisījumā lādētas sastāvdaļas..

Atsauce:

1. “Afinitātes hromatogrāfija.” Wikipedia, Wikimedia Foundation, 2018. gada 5. oktobris. Pieejams šeit 
2. Libreteksti. “Jonu apmaiņas hromatogrāfija.” Ķīmija LibreTexts, Libretexts, 2016. gada 29. decembris. Pieejams šeit  

Attēla pieklājība:

1. “Niķeļa sveķi” Autors: Pdcook - Savs darbs, (CC BY-SA 3.0), izmantojot Commons Wikimedia 
2. “Iex”, autors Daliak (publiskais īpašums), izmantojot Commons Wikimedia