Atšķirība starp Bredfordas un Lowry olbaltumvielu testu

galvenā atšķirība starp Bradfordu un Lowry olbaltumvielu testu ir šāds Bredfordas olbaltumvielu pārbaude balstās uz Coomassie izcili zilās krāsas G-250 absorbcijas maiņu, savukārt Lowry olbaltumvielu noteikšana balstās uz vara jonu (Cu +) jonu reakciju, kas rodas, oksidējot peptīdu saites ar Folīna-Kiokalteu reaģentu..

Pārbaude ir analītiska metode, kas palīdz raksturot parauga galvenās funkcionālās sastāvdaļas. Tādējādi pārbaude varētu būt gan kvalitatīvs, gan kvantitatīvs tests. Daudzās jomās, tostarp laboratorijas medicīnā, farmakoloģijā, vides bioloģijā, molekulārajā bioloģijā, bioķīmijā un imunoloģijā, šāda veida pārbaudes tiek izmantotas regulāri. Bredfordas un Lerija olbaltumvielu pārbaude ir divas bioķīmiskās analīzes, kas nosaka olbaltumvielu koncentrāciju parauga šķīdumā. Abos testos rezultātu iegūšanai izmanto kolorimetriskās metodes.

SATURS

1. Pārskats un galvenās atšķirības
2. Kas ir Bredforda olbaltumvielu noteikšana
3. Kas ir Lowry olbaltumvielu noteikšana
4. Līdzības starp Bredfordu un Lowry olbaltumvielu testu
5. Salīdzinājums blakus - Bradforda un Lowry olbaltumvielu analīze tabulas formā
6. Kopsavilkums

Kas ir Bredfordas olbaltumvielu noteikšana?

Bredfordas olbaltumvielu noteikšana ir ātra spektroskopiska analītiska procedūra olbaltumvielu analīzei. Tas parāda augstu precizitāti, mērot olbaltumvielu koncentrāciju šķīdumā. Marions Bredfords ieviesa šo procedūru 1976. gadā. Šajā testā kopējā reakcija balstās uz izmērīto olbaltumvielu aminoskābju sastāvu. Citiem vārdiem sakot, Bredfordas olbaltumvielu pārbaude ir kolorimetriska pārbaude. Tas izmanto krāsu Coomassie izcili zilu. Tādējādi šī kolorimetriskā olbaltumvielu pārbaude ir atkarīga no krāsvielas absorbcijas nobīdes. Coomassie briljantzils G-250 pastāv trīs formātos: katjonu (sarkans), anjonu (zils) un neitrāls (zaļš). Skābos apstākļos krāsas sarkanā forma tiek pārveidota par zilu. Tas apstiprina olbaltumvielu saistīšanos. Ja olbaltumvielu nav, šķīdums var palikt brūnā krāsā.

01. attēls: Bredfordas olbaltumvielu pārbaude

Bredfordas olbaltumvielu pārbaude atšķiras no citām olbaltumvielu pārbaudēm, jo ​​tā ir mazāk jutīga pret dažādu ķīmisku savienojumu, kas atrodas olbaltumvielu šķīdumā, mijiedarbību. Šie savienojumi ietver nātriju, kāliju, glikozi un saharozi utt.

Kas ir Lowry olbaltumvielu noteikšana?

Lowry olbaltumvielu noteikšana ir bioķīmiskais tests, ko izmanto, lai noteiktu kopējo olbaltumvielu līmeni šķīdumā. Olivers H. Lerijs ir persona, kas 1940. gadā izstrādāja šo reaģentu. Procedūra attēlo kopējo olbaltumvielu koncentrāciju šķīdumā ar krāsas maiņu, kas ir proporcionāla olbaltumvielu koncentrācijai šķīdumā. Tādējādi tas ir arī kolorimetrisks olbaltumvielu tests.

Šīs procedūras pamatā ir reakcija starp vara joniem (Cu +), kas rodas, oksidējot peptīdu saites, un Folīna-Kiokalteu reaģentu. Šis reaģents satur arī fosfomolibdīnskābi un fosfora volframskābi. Tomēr Lowry olbaltumvielu testa reakcijas mehānisms nav labi saprotams. Bet tas ietver cisteīna, triptofāna un tirozīna atlikumu oksidēšanu, samazinot Folīna-Kiokalteu reaģentu.

02 attēls: Lowry olbaltumvielu noteikšana

Cisteīna atlikumi veicina absorbciju, kas novērota Lowry olbaltumvielu testā, un reakcijas rezultātā rodas spoži zila molekula; heteropolija molibdēna zils. Šīs molekulas samazinājumu mēra ar absorbciju pie 660 nm. Tādējādi cisteīna un triptofāna atlikumu koncentrācija, kas samazināja Folīna-Kiokalteu reaģentu, secina kopējo olbaltumvielu koncentrāciju šķīdumā..

Kādas ir līdzības starp Bredfordu un Lowry proteīna testu?

• Bredfordas un Lerija olbaltumvielu testi nosaka olbaltumvielu koncentrāciju šķīdumā.
• Abas metodes ir kolorimetriskas metodes.
• Arī abu metožu jutība ir augsta.

Kāda ir atšķirība starp Bredfordu un Lowry olbaltumvielu testu?

Bredfordas un Lowry olbaltumvielu pārbaude ir divu veidu testi, kas nosaka olbaltumvielu koncentrāciju šķīdumā. Bredfordas olbaltumvielu noteikšana ir atkarīga no Coomassie izcili zilās krāsas G-250 absorbcijas maiņas, savukārt Lowry olbaltumvielu noteikšana ir atkarīga no vara jonu reakcijas, kas rodas, oksidējot peptīdu saites, ar Folīna-Ciocalteu reaģentu. Tātad, šī ir galvenā atšķirība starp Bredfordas un Lowry olbaltumvielu testu. Bredfordas olbaltumvielu pārbaude rezultāta iegūšanai prasa 15 minūtes, savukārt Lowery olbaltumvielu noteikšanai rezultāta iegūšana prasa 40–60 minūtes. Tādējādi šī ir vēl viena atšķirība starp Bredfordas un Lowry olbaltumvielu testu. Turklāt Bredfordas olbaltumvielu noteikšana ir atkarīga no aminoskābju sastāva, savukārt Lowry olbaltumvielu noteikšana ir daļēji atkarīga no aminoskābju sastāva. Tādējādi šī ir arī atšķirība starp Bredfordas un Lowry olbaltumvielu testu.

Zemāk inforaphic sniedz sīkāku informāciju par atšķirību starp Bredfordas un Lowry olbaltumvielu testu.

Kopsavilkums - Bradforda un Lowry olbaltumvielu analīze

Pārbaude ir analītiska metode, ko izmanto parauga galvenās funkcionālās sastāvdaļas raksturošanai. Bredfordas un Lovrija olbaltumvielu analīze ir divu veidu olbaltumvielu testi, kas darbojas ar kolorimetriskām metodēm. Gan Bredfordas, gan Lowry olbaltumvielu testi nosaka olbaltumvielu koncentrāciju šķīdumā. Tomēr galvenā atšķirība starp Bredfordu un Lowry olbaltumvielu testu ir saistīta ar kolorimetrisko paņēmienu, ko viņi izmanto. Bredfordas olbaltumvielu testā tiek izmantots Coomassie izcili zilais G-250, savukārt Lowry olbaltumvielu testā tiek izmantoti vara joni (Cu +) joni un Folīna-Kiokalteu reaģents. Turklāt Bredforda metode dod ātrus rezultātus nekā Lowry olbaltumvielu noteikšana. Tomēr abas metodes ir ļoti jutīgas metodes, un tās var ietekmēt dažādas vielas.

Atsauce:

1. “Kanādas botānikas žurnāls”. Kanādas žurnāls par botāniku - 60 (7): 1046 - PDF, pieejams šeit.
2. “Olbaltumvielu analīžu ķīmija.” Thermo Fisher Scientific - ASV, pieejams šeit.

Attēla pieklājība:

1. Helito “Bradforda olbaltumvielu pārbaude” - Savs darbs (CC BY-SA 4.0), izmantojot Commons Wikimedia