Atšķirība starp gēnu pastiprināšanu un gēnu klonēšanu

galvenā atšķirība starp gēnu amplifikāciju un gēnu klonēšanu ir tas, ka gēna amplifikācija ir process, kurā tiek izgatavotas daudzas interesējošā gēna kopijas in vitro ar polimerāzes ķēdes reakciju. Gēnu klonēšana ir process, kurā tiek izgatavotas daudzas interesējošā gēna kopijas in vivo pagatavojot rekombinantu plazmīdu un pārveidojot to par saimnieka baktēriju.

Gēns ir noteikts DNS fragments, kas kodē olbaltumvielu. Organismam ir tūkstošiem gēnu. Turklāt, izmantojot molekulārbioloģiskās metodes, ir iespējams pavairot svarīgu gēnu DNS sekvences. Gēnu amplifikācija un gēnu klonēšana ir divas šādas procedūras. Abas procedūras rada daudzus interesējošā gēna eksemplārus. Tomēr starp gēnu amplifikāciju un gēnu klonēšanu ir atšķirība to metodoloģijas ziņā.

SATURS

1. Pārskats un galvenās atšķirības
2. Kas ir gēnu pastiprināšana
3. Kas ir gēnu klonēšana
4. Gēnu pastiprināšanas un gēnu klonēšanas līdzības
5. Salīdzinājums blakus - gēnu pastiprināšana vs gēnu klonēšana tabulas formā
6. Kopsavilkums

Kas ir gēnu pastiprināšana?

Gēna pastiprināšana ir konkrēta gēna kopiju izgatavošanas process, izmantojot polimerāzes ķēdes reakciju. Lai amplificētu gēnu, šī konkrētā organisma DNS ir jāekstrahē, izmantojot pareizu DNS ekstrakcijas protokolu. Tad ekstrahētajai divpavedienu DNS vajadzētu denaturēt, lai iegūtu atdalītas atsevišķas šķiedras. Nākamais solis ietver PCR reakcijas izmantošanu, lai izgatavotu interesējošā gēna kopijas. Turklāt PCR maisījums satur nepieciešamos gruntējumus, nukleotīdus, DNS polimerāzes enzīmu, matricas DNS un citas sastāvdaļas. ĶTR programmas beigās notiek interesējošā gēna amplifikācija.

01. attēls. Gēna pastiprināšana

Turklāt gēnu amplifikācija ir sākotnējs solis noteiktas secības noteikšanā, organisma identificēšanā, slimību diagnosticēšanā un gēnu bibliotēku veidošanā utt..

Kas ir gēnu klonēšana?

Gēnu klonēšana ir metode gēnu inženierijā, lai izveidotu gēnu bibliotēkas vai izgatavotu daudzas interesējošā gēna kopijas. Šis process ietver rekombinantās plazmidijas izgatavošanu un rekombinantās plazmīdas pārveidošanu saimnieka šūnā, īpaši baktēriju šūnā. Klons ir identisks sākotnējā organisma vai molekulas eksemplārs. Gēnu klonēšana var radīt tūkstošiem gēnu klonu.

02 attēls: gēnu klonēšana

Kad interesējošais gēns ir identificēts, to var atdalīt no konkrēta organisma genoma, ierobežojot to ar īpašiem restrikcijas fermentiem. Pēc tam, izmantojot to pašu restrikcijas enzīmu, jāatver plazmīdas (vektori), lai ievietotu gēna fragmentu. Pēc tam rekombinantā plazmīda tiek pārveidota par baktēriju saimnieku, izmantojot dažādas metodes, piemēram, elektroporāciju. Daži no rekombinantiem plazmidiem nonāk baktēriju saimnieku šūnās. Izmantojot antibiotiku, pārveidotās baktērijas var atlasīt, izolēt un kultivēt svaigā barotnē. Tādējādi šī metode palīdz iegūt miljoniem gēnu klonu.

Kādas ir līdzības starp gēnu pastiprināšanu un gēnu klonēšanu?

• Gēnu amplifikācija un gēnu klonēšana ir divas molekulāri bioloģiskās metodes.
• Abos šajos paņēmienos noteikta DNS sekvence vai gēns reizinās miljonos vai tūkstošos reižu.
• Turklāt abas metodes ir ārkārtīgi svarīgas daudzās zinātnes jomās.

Kāda ir atšķirība starp gēnu pastiprināšanu un gēnu klonēšanu?

Gēnu amplifikācija ir process, kura laikā tiek izgatavots konkrēta gēna kopijas, izmantojot in vitro metode, ko sauc par PCR. No otras puses, gēnu klonēšana ir process, kurā, izmantojot, tiek izgatavotas konkrēta gēna kopijas in vivo metode, konstruējot rekombinantos vektorus un pavairot tos dzīvā organismā. Tātad, šī ir galvenā atšķirība starp gēnu amplifikāciju un gēnu klonēšanu. Turklāt gēna amplifikācija prasa tikai dažas stundas, savukārt gēna klonēšana prasa vairākas dienas. Tāpēc arī mēs to varam uzskatīt par atšķirību starp gēnu amplifikāciju un gēnu klonēšanu. Turklāt gēnu amplifikācijas procesā tiek parādīts mazāk kļūdu, savukārt gēnu klonēšanas procesā - vairāk kļūdu.

Šajā infografikā ir apkopota atšķirība starp gēnu amplifikāciju un gēnu klonēšanu.

Kopsavilkums - gēnu pastiprināšana vs gēnu klonēšana

Gēna amplifikācija ir vēlamā gēna kopiju izgatavošanas process, izmantojot polimerāzes ķēdes reakciju in vitro, savukārt gēna klonēšana ir interesējoša gēna kopiju izgatavošanas process, izmantojot rekombinantās DNS molekulu un dzīvo organismu / saimnieka baktēriju. Tādējādi šī ir galvenā atšķirība starp gēnu amplifikāciju un gēnu klonēšanu.

Atsauce:

1. “Molekulārā klonēšana.” Wikipedia, Wikimedia Foundation, 2019. gada 2. augusts, pieejama šeit.
2. “Gēnu pastiprināšana”. Gēnu pastiprināšana - pārskats | ScienceDirect tēmas, pieejamas šeit.

Attēla pieklājība:

1. Madprime “PCR” - paša darbs (CC BY-SA 3.0), izmantojot Commons Wikimedia
2. Alexpicardal97 “Molekulārās klonēšanas soļi” - Savs darbs (CC BY-SA 4.0), izmantojot Commons Wikimedia