Starpība starp HPLC un ātro HPLC

galvenā atšķirība starp HPLC un ātro HPLC ir tas, ka sūkņa spiediens, ko mēs izmantojam HPLC, ir aptuveni 40 MPa, turpretī ātras HPLC sūkņa spiediens ir aptuveni 3-5 MPa.

Visizplatītākā metode, ko izmantojam maisījuma sastāvdaļu atdalīšanai, ir “šķidruma hromatogrāfija”. Lai sasniegtu šo mērķi, ir vairākas metodes, no kurām HPLC ir ļoti populāra. HPLC nozīmē augstas izšķirtspējas šķidruma hromatogrāfiju, kas ātri un efektīvi identificē, kvantitatīvi nosaka un atdala šķidrā maisījuma sastāvdaļas. Ātrā HPLC ir īpaša HPLC pielietošana, kas novēloti ir piesaistījusi risinājumu izpētē iesaistīto personu uzmanību.

SATURS

1. Pārskats un galvenās atšķirības
2. Kas ir HPLC
3. Kas ir ātrā HPLC
4. Salīdzinājums blakus - HPLC salīdzinājumā ar ātru HPLC tabulas veidā
5. Kopsavilkums

Kas ir HPLC?

HPLC ir augstas izšķirtspējas šķidruma hromatogrāfija. Tas izmanto augstu spiedienu, lai spīdinātu šķīdinātājus, lai tie izietu caur kolonnu. Tas ir arī ideāls veids, kā atdalīt un izpētīt dažādus savienojumus, piemēram, aminoskābes, nukleīnskābes, ogļhidrātus, steroīdus, antibiotikas un ogļūdeņražus. HPLC ir daudz priekšrocību salīdzinājumā ar citām maisījumu atdalīšanas metodēm, piemēram, augstāka izšķirtspēja un ātrāka analīze. Tas novērš nepieciešamību pārsaiņot un reģenerēt, kā arī piedāvā labāku parametru kontroli un tādējādi palielina atdalīšanas efektivitāti. Ideālā gadījumā HPLC ir piemērota liela mēroga lietojumiem, jo ​​tā var atdalīt ļoti mazas daļiņas un ļauj izmantot augstu spiedienu, kas atvieglo šķīdinātāju plūsmu.

01. attēls: HPLC kolonna

Īsumā HPLC tehnikas darbības metode ir šāda. Pirmkārt, mums ar sūkni jāievieš paraugs mobilās fāzes plūsmā atsevišķos, mazos daudzumos. Sūkņa spiediens jāuztur pie 40 MPa. Šī mobilās fāzes plūsma perkolē caur HPLC kolonnu. Pēc tam parauga sastāvdaļas iziet arī caur kolonnu. Tomēr to kustības ātrumi atšķiras viens no otra, jo atšķiras parauga sastāvdaļu un kolonnas iekšpusē esošā adsorbenta mijiedarbība. Mēs to saucam par stacionāru fāzi, jo tā atrodas kolonnas iekšpusē (nekustas). Pēc tam kolonnas beigās mēs varam savākt paraugu, kas eluējas no kolonnas, tādējādi mēs atsevišķi varam savākt komponentus paraugā.

Kas ir ātra HPLC?

Nesen Schering Plough pētniecības institūta zinātnieki izstrādāja ātru HPLC paņēmienu, kas ir uzlabota HPLC versija, jo tas ļauj vēl ātrāk atdalīt savienojumus no maisījuma. Šī metode, kas pazīstama arī kā ātrā HPLC, izmanto 2,7% kausēta silīcija dioksīda daļiņas, kuras iegūst, sakausējot 0.5um porainu silīcija dioksīdu virs cietas silīcija dioksīda daļiņas. Šīs unikāli izgatavotās daļiņas padara atdalīšanas procesu ļoti ātru, turklāt pārāk zemā pretspiedienā nekā tas, ko mēs izmantojam HPLC.

02 attēls: FPLC iekārta

Ātrā HPLC iegūst rezultātus, kas salīdzināmi ar UPLC, taču zinātnieki uzskata, ka šī tehnika ir pārāka, jo tai nav vajadzīgas ļoti dārgas īpaši augsta spiediena iekārtas. Lieliski, ka ātrai HPLC nav nepieciešami jauni laboratorijas protokoli.

Kāda ir atšķirība starp HPLC un ātro HPLC?

HPLC ir augstas izšķirtspējas šķidruma hromatogrāfija, un ātrā HPLC ir augstas izšķirtspējas šķidruma hromatogrāfijas uzlabotā forma. Galvenā atšķirība starp HPLC un ātro HPLC ir tāda, ka sūkņa spiediens, ko mēs izmantojam HPLC, ir aptuveni 40 MPa. Tā kā sūkņa spiediens ātrai HPLC ir aptuveni 3-5 MPa. Turklāt, izmantojot HPLC paņēmienu, mēs varam atdalīt dažādus savienojumus, piemēram, aminoskābes, nukleīnskābes, ogļhidrātus, steroīdus, antibiotikas un ogļūdeņražus, savukārt ātro HPLC paņēmienu galvenokārt izmanto olbaltumvielu atdalīšanai..

Zemāk esošajā infografikā ir sniegta vairāk informācijas par atšķirību starp HPLC un ātro HPLC.

Kopsavilkums - HPLC vs ātrā HPLC

HPLC ir šķidruma hromatogrāfijas metode, kas ir kļuvusi ļoti populāra visā pasaulē. Ātrā HPLC ir jauna HPLC versija, Schering Plough institūta zinātnieki izstrādāja šo jauno paņēmienu. Galvenā atšķirība starp HPLC un ātru HPLC ir atkarīga no sūkņa spiediena, ko mēs izmantojam atdalīšanai. Tas ir; sūkņa spiediens, ko izmantojam HPLC, ir aptuveni 40 MPa. Bet sūkņa spiediens ātrai HPLC ir aptuveni 3-5 MPa.

Atsauce:

1. “Augstas izšķirtspējas šķidruma hromatogrāfija.” Wikipedia, Wikimedia Foundation, 2018. gada 20. oktobris. Pieejams šeit 
“Jums ir nepieciešama izdomāta sistēma, lai ātri veiktu HPLC - vai jūs to darāt?” Ātra HPLC - hromakadēmija. Pieejams šeit  

Attēla pieklājība:

1. “HPLC kolom” durvis Jmave, rcvanwijk - Eigen werk, (Public Domain) caur Commons Wikimedia  
2. “Lab's FPLC” Autors: Stefans Helmss no Dalasas, Teksasas štatā, Amerikas Savienotajās Valstīs. Mūsu laboratorijas FPLC (CC BY-SA 2.0), izmantojot Commons Wikimedia