Galvenā atšķirība starp HPLC un HPTLC ir tā HPLC ļauj kvantitatīvi atdalīt komponentus paraugā, savukārt HPTLC neļauj kvantitatīvi atdalīt komponentus paraugā.
Hromatogrāfija ir fiziskas atdalīšanas metode, kuru izmanto, lai atdalītu un identificētu maisījuma sastāvdaļas. Gan HPLC, gan HPTLC ir hromatogrāfijas metodes. HPLC ir augstas izšķirtspējas šķidruma hromatogrāfija. HPTLC ir augstas izšķirtspējas plānslāņa hromatogrāfija.
1. Pārskats un galvenās atšķirības
2. Kas ir HPLC
3. Kas ir HPTLC
4. Salīdzinājums blakus - HPLC vs HPTLC tabulas veidā
5. Kopsavilkums
HPLC ir augstas izšķirtspējas šķidruma hromatogrāfija. Tas ir analītisks paņēmiens, ko izmanto maisījumu sastāvdaļu atdalīšanai, identificēšanai un daudzuma noteikšanai. Šajā metodē paraugu izšķīdina piemērotā šķīdinātājā. Tad šķīdinātāju ar paraugu izlaiž caur sūkni ar noteiktu spiedienu. Sūknis ir piepildīts ar cietu adsorbentu. Tad daži komponenti stingri saistās ar absorbējošo materiālu, turpretī citi komponenti saistās vāji. Tas izraisa sastāvdaļu atšķirīgu plūsmas ātrumu caur sūkni. Tāpēc komponentus var viegli atdalīt.
01. attēls: HPLC sistēma
Adsorbenta materiāls, kas piepilda sūkni, ir pazīstams kā stacionārā fāze. Šķīdinātāju ar izšķīdušo paraugu sauc par kustīgo fāzi. Šajā tehnikā izmantoto sūkni sauc par kolonnu. Kolonna ir piepildīta ar adsorbējošu materiālu, visbiežāk ar silīcija dioksīda daļiņām. Šo daļiņu lielums var svārstīties no 2–50 μm. Atdalīšanas procesu ietekmē mobilās fāzes sastāvs un sistēmas temperatūra. Stacionārās fāzes un parauga sastāvdaļas mijiedarbība var būt hidrofobiska mijiedarbība, dipola-dipola mijiedarbība, jonu saistīšana utt..
HPLC darba spiediens ir ievērojami augstāks nekā tradicionālajā šķidruma hromatogrāfijā. Tas atrodas ap 50-350 bāriem. Atšķirība starp šķidruma hromatogrāfiju un HPLC ir tāda, ka šķidruma hromatogrāfijā paraugs izkrīt caur kolonnu gravitācijas ietekmē, turpretim, izmantojot HPLC, paraugu ar spiedienu izlaiž caur kolonnu. Kolonnas izmērs un absorbējošās daļiņas ir arī ļoti mazas, salīdzinot ar tradicionālo šķidruma hromatogrāfiju. Tomēr izšķirtspēja, ko nodrošina HPLC tehnika, ir augstāka.
HPTLC ir augstas izšķirtspējas plānslāņa hromatogrāfija. Tā ir tradicionālās TLC uzlabotā un automatizētā forma. Šis paņēmiens nodrošina efektīvu izšķirtspēju īsā laika posmā. Šajā analīzes metodē paraugu un atsauci var analizēt vienlaikus, kas ļauj paraugu salīdzināt ar atsauci. Tas dod uzlabotu analītisko precizitāti nekā citas hromatogrāfijas metodes. Laiks, kas nepieciešams analīzei, ir mazāks. Tehnika ir lēta tehnika.
02. Attēls. Pārtikas krāsvielu analīze, izmantojot HPTLC
HPTLC metode ir vienkāršs process, un arī parauga sagatavošanas posms tiek novērsts (tradicionālajā TLC paraugu sagatavošanas posms ir iekļauts pirms atdalīšanas. Šis posms ietver tīrīšanu un bagātināšanu). Šķīdinātāju var izmantot tieši, bez iepriekšējas apstrādes, lai gan citām hromatogrāfijas metodēm ir nepieciešama iepriekšēja apstrāde, piemēram, degazēšana, filtrēšana utt..
Adsorbenta materiāls, ko izmanto HPTLC, ir silīcija dioksīds ar ļoti mazu daļiņu izmēru. Tradicionālajā TLC silīcija dioksīda daļiņu izmērs ir 5-20 μm, turpretī HPTLC tas ir 4-8 μm. Paraugu ar aplikatoru uzliek HPTLC plāksnei. Tas nodrošina vienotu un drošu pielietojumu. Tad plāksnes ievieto kamerā ar kustīgo fāzi. Kamerai jābūt piesātinātai ar kustīgās fāzes tvaikiem. Pēc HPTLC procesa var atklāt pārvietojušos plankumus. Atklājot plankumus uz plāksnes, HPTLC tehnika izmanto piemērotu UV apgabalu vai joda kameru.
HPLC pret HPTLC | |
HPLC ir augstas izšķirtspējas šķidruma hromatogrāfija. | HPTLC ir augstas izšķirtspējas plānslāņa hromatogrāfija. |
Tehnika | |
HPLC, kustīgā fāze ar šķīdinātāju tiek izvadīta caur kolonnu, kas piepildīta ar nekustīgo fāzi. | HPTLC paraugu plankumaina uz TLC plāksnes un ievieto kamerā, kurā atrodas kustīgā fāze; tad paraugam kopā ar kustīgo fāzi ļauj migrēt augšup pa plāksni. |
Mērīšana | |
HPLC, komponentu atdalīšanai paraugā izmanto atšķirības starp komponentu plūsmas ātrumiem caur kolonnu. | HPTLC, lai atdalītu komponentus paraugā, izmanto atšķirības starp attālumiem, kurus nobraucis katrs parauga komponents. |
Kvantitatīvā atdalīšana | |
HPLC ļauj kvantitatīvi atdalīt komponentus paraugā. | HPTLC neļauj kvantitatīvi atdalīt komponentus paraugā. |
HPLC un HPTLC ir divas hromatogrāfijas metodes. Galvenā atšķirība starp HPLC un HPTLC ir tā, ka HPLC ļauj kvantitatīvi atdalīt komponentus paraugā, turpretī HPTLC neļauj kvantitatīvi atdalīt komponentus paraugā.
1. “Augstas izšķirtspējas šķidruma hromatogrāfija.” Wikipedia, Wikimedia Foundation, 2018. gada 10. aprīlis, pieejams šeit.
2. “HPTLC.” LinkedIn SlideShare, 2011. gada 30. maijs, pieejams šeit.
1. “HPTLCplatetoMS” Autors Kjaergaards angļu Vikipēdijā - Pārsūtīts no en.wikipedia uz Commons (Public Domain), izmantojot Commons Wikimedia
2. “Hplc” Autors: PD Dr. rer. nat. habil. Gertrud MorlockAsociētais profesors (Privatdozentin) Hohenheimas UniversitātePārtikas ķīmijas institūts - G. Morlock, C. Oellig, CAMAG Bibliogrāfijas dienests 103 (2009), izmantojot Commons Wikimedia