Atšķirība starp situācijas hibridizāciju un imūnhistoķīmiju

Galvenā atšķirība - situācijas hibridizācija salīdzinājumā ar imūnhistoķīmiju
 

Vēža un infekcijas slimību diagnostika ir populāra tendence, kad tiek izmantotas jaunas uz proteomiku un genomiku balstītas metodes, lai identificētu audzējus vai infekcijas šūnas, to izplatīšanos un šūnu attīstības vietas un analizētu lielāko daļu lipīgo un neinfekciozo slimību ģenētisko bāzi. Tā rezultātā tiks veikta precīza zāļu apstrāde un izstrāde, kā arī tiks izstrādāta pielāgota slimību terapija. In situ hibridizācija (ISH) un imūnhistoķīmija (IHC) ir divas tik plaši izmantotas metodes vēža bioloģijā, un galvenā atšķirība starp in situ hibridizāciju un imūnķīmiju slēpjas molekulās, kuras izmanto analīzes procedūrā. ISH analīzē izmanto nukleīnskābju zondes, turpretī IHC diagnostiskajās noteikšanās izmanto monoklonālās un poliklonālās antivielas.

SATURS

1. Pārskats un galvenās atšķirības
2. Kas ir situācijas hibridizācija
3. Kas ir imūnhistoķīmija
4. Līdzības starp hibridizāciju in situ un imūnhistoķīmiju
5. Blakus salīdzinājums - situācijas hibridizācija vs imūnhistoķīmija tabulas formā
6. Kopsavilkums

Kas ir situācijas hibridizācija (ISH)?

In situ hibridizācija ir nukleīnskābju hibridizācijas metode, ko tieši veic audu daļai vai daļai, visiem audiem vai šūnām. Metode ir atkarīga no Vatsona Krika komplementāro bāzu pāru veidošanas teorijas, iegūstot vai nu DNS-DNS hibrīdus, vai DNS-RNS hibrīdus, kas var atklāt mutācijas gēnus vai identificēt nepieciešamo interesējošo gēnu. Hibridizācijas tehnikas laikā kā zondi tiek izmantotas vienpavedienu DNS sekvences, divpavedienu DNS sekvences, vienpavedienu RNS sekvences vai sintētiskas oligonukleotīdu sekvences, un šīs zondes ir apzīmētas ar radioaktīvo fosforu tā 5 'galā identifikācijas procedūru veikšanai pēc autoradiogrāfijas vai marķētas, izmantojot fluorescējošas krāsvielas . Ir pieejami dažādi ISH metožu veidi, kuru pamatā ir izmantotās zondes tips un ievērotās vizualizācijas tehnikas tips.

01. attēls: Fluorescējoša situācijas hibridizācija

Ir daudz ISH pielietojumu, galvenokārt infekcijas slimību molekulārajā diagnostikā, lai identificētu patogēnu klātbūtni un apstiprinātu patogēnu ar molekulārās diagnostikas palīdzību. To izmanto arī attīstības bioloģijas, kariotipēšanas un filoģenētiskās analīzes un hromosomu fiziskās kartēšanas jomās.

Kas ir imūnhistoķīmija (IHC)?

IHC tehnikā galvenā analizētā molekula ir antigēns. IHC laikā monoklonālās un poliklonālās antivielas tiek izmantotas, lai noteiktu antigēnu klātbūtni pēc infekcijas vai ļaundabīgu šūnu proliferācijas statusa. Šīs metodes pamatā ir antigēna un antivielu saistīšana, un šai metodei tiek izmantotas enzīmu etiķetes; viens no šādiem lietojumiem ir ELISA (ar enzīmu saistīts imūnsorbcijas tests). Marķieri var būt arī ar fluorescējošām antivielām vai radioaktīvi iezīmētas antivielas.

02 attēls: imūnhistoķīmija

IHC plaši izmanto vēža šūnu noteikšanai. Diagnostikas procedūras ir vērstas uz antigēniem, kas atrodas uz audzēja šūnām, lai identificētu un raksturotu audzēju. Tāda pati procedūra ir iekļauta infekcijas izraisītāju diagnosticēšanā. Monoklonālās un poliklonālās antivielas tiek izmantotas arī dažādu gēnu produktu analīzei, ļaujot antivielu un antigēnu saistīšanai starp vēlamo olbaltumvielu un ievadīto sintētisko antivielu.

Kādas ir situācijas hibridizācijas un imūnhistoķīmijas līdzības?

• ISH un IHC ir ļoti specifiskas reakcijas.
• Abas tehnikas ir ļoti precīzas.
• Abas metodes var izmantot vēža un infekcijas slimību diagnostikā.
• Šīs metodes tiek veiktas sterilā in vitro vidē.
• Abas ir ātras metodes, kas nodrošina atkārtojamus rezultātus.
• ISH un IHC izmanto tādas detektēšanas metodes kā radio marķēšana un fluorescences metodes.

Kāda ir atšķirība starp situācijas hibridizāciju un imūnhistoķīmiju?

In situ hibridizācija pret imūnhistoķīmiju
ISH ir nukleīnskābju hibridizācijas metode, ko tieši veic audu daļai vai daļai vai visiem audiem.	IHC ir paņēmiens, kurā antigēnu klātbūtnes noteikšanai tiek izmantotas monoklonālās un poliklonālās antivielas, kas ir īpaši olbaltumvielu marķieri, kas izvietoti uz šūnu virsmām.
Analizēto biomolekulu tips
ISH analizē nukleīnskābes.	IHC analizē olbaltumvielas-antigēnus.
Bioķīmiskās reakcijas pamati
Šajā paņēmienā notiek papildu DNS un DNS-DNS savienošana.	Imunohistoķīmijā ir iesaistīta antigēna un antivielu mijiedarbība.
Ar enzīmu saistītās noteikšanas metodes
ISH nevar izmantot ar enzīmu saistītās noteikšanas metodes.	IHC var izmantot enzīmu noteikšanas metodes.

Kopsavilkums - situācijas hibridizācija salīdzinājumā ar imūnhistoķīmiju

Molekulārā diagnostika ir ātras un apstiprinošas metodes, kuras var izmantot, lai identificētu neinfekciozu slimību, piemēram, vēzi vai lipīgu slimību, piemēram, HIV vai tuberkulozi, pamatojoties uz molekulārajiem marķieriem, kas atrodas uz šūnām un noved pie slimības izpausmes. Molekulārie marķieri var būt izteiktu olbaltumvielu veidā vai ģenētiskā līmenī, pamatojoties uz kuriem tiek ieviestas dažādas jaunas metodes, lai palielinātu efektivitāti un būtu mazāk darbietilpīgas, lai gan šīs metodes ir saistītas ar lielām izmaksām. Tādējādi ISH ir atkarīgs no DNS-DNS vai DNS-RNS hibrīda veidošanās, un IHC ir atkarīgs no specifiskajām reakcijām starp antivielu un antigēnu. Tā ir atšķirība starp hibridizāciju in situ.

Lejupielādējiet In situ hibridizācijas un imūnhistoķīmijas PDF versiju

Varat lejupielādēt šī raksta PDF versiju un izmantot to bezsaistes vajadzībām, kā norādīts citēšanas piezīmē. Lūdzu, lejupielādējiet šeit PDF versiju. Atšķirība starp hibridizāciju situācijā un imūnhistoķīmiju.

Atsauces:

1. Duraiyan, Jeyapradha, et al. “Imunohistoķīmijas pielietojumi.” Journal of Pharmacy & Bioallied Sciences, Medknow Publications & Media Pvt Ltd, 2012. gada augusts, pieejams šeit. Piekļuve 2017. gada 24. augustam.
2. “In situ hibridizācija (ISH).” Nacionālais biotehnoloģijas informācijas centrs, ASV Nacionālā medicīnas bibliotēka, pieejams šeit. Piekļuve 2017. gada 24. augustam.

Attēla pieklājība:

1. “FISH (Fluorescent In situ Hybridization)”. Mr. Matze - Savs darbs (CC BY-SA 3.0), izmantojot Commons Wikimedia
2. “Immunohistochemicalstaining2” Autors: Imoen angļu valodas Vikipēdijā (CC BY-SA 3.0), izmantojot Commons Wikimedia