Atšķirība starp transformāciju un transfekciju

Transformācija vs transfekcija
 

Transformācija un transfekcija ir divas vienkāršas metodes, ko izmanto sveša gēna ievadīšanai saimnieka šūnā. Tomēr šīs metodes ir atkarīgas no saimniekdatora vai vektoru sistēmu veida.

Kas ir šūnu transformācija?

Transformācija ir paņēmiens, kas tiek izmantots gēnu ievadīšanai rauga un baktēriju šūnās. Šis paņēmiens parasti izraisa pārmantojamas izmaiņas gēnos, un tādējādi gēna ekspresija ir pastāvīga. Baktēriju pārveidošanu pirmo reizi ieviesa 1928. gadā Frederiks Grifits. Tad 1970. gadu sākumā šī tehnika tika izmantota E. coli. Pārveidošanas procesa laikā E. coli, šūnas iemērc ledusaukstā CaCl šķīdumā2. Šis solis padara E.coli šūnas kompetenta. Pēc tam kompetentās šūnas sajauc ar plazmīdu DNS un inkubē uz ledus 20-30 minūtes. Pēc tam tiek dots īss karstuma šoks, lai ļautu DNS pārnest šūnā. Visbeidzot, šūnas ievieto barības vielu buljonā un inkubē 37 ° C 60-90 minūtes, lai izveidotu plazmīdas. Kad šīs darbības ir veiksmīgi veiktas, pārveidotās šūnas var novietot uz piemērotas barotnes šūnu pavairošanai. Tā kā transformācija tiek uzskatīta par neefektīvu paņēmienu, to nevar izmantot klonu banku sagatavošanai.

Kas ir šūnu transfekcija?

Transfekcija ir metode sveša gēna ievadīšanai parasti zīdītāju šūnās. Ir divas transfekcijas metodes; proti, īslaicīga transfekcija un stabila transfekcija. Pārejošas transfekcijas laikā gēnu ekspresija ir pieejama ierobežotu laiku; tādējādi gēna maiņa izraisa īslaicīgu ekspresiju. Šī transfekcijas metode ir vienkārša un ātra; tāpēc to var izmantot regulāri. Viens īslaicīgas transfekcijas trūkums ir grūtības pieteikties liela mēroga olbaltumvielu sintēzes sistēmām.

Stabilas transfekcijas laikā mērķa gēns tiek integrēts saimnieka šūnas genomā, un tādējādi atšķirībā no īslaicīgas transfekcijas gēna ekspresija ir pastāvīga.

Kāda ir atšķirība starp transformāciju un transfekciju?

• Transformācija ir gēna ievadīšana prokariotu šūnā (baktēriju un raugā), turpretī transfekciju parasti sauc par gēna ievadīšanu zīdītāja šūnā.

• Transformācija rada ģenētiskas pārmaiņas, turpretī transfekcija var izraisīt īslaicīgu ekspresiju vai pastāvīgas izmaiņas gēnos.