Atšķirība starp pārejošu un stabilu transfekciju

Galvenā atšķirība - pārejoša vs stabila transfekcija
 

Transfekcija ir process, kas iesaistīts eikariotu šūnu gēnu pārnesē, izmantojot ķīmiskas vai fizikālas metodes. Transfekciju var iedalīt divos galvenajos veidos, kurus sauc par īslaicīgu transfekciju un stabilu transfekciju. Pārejošas transfekcijas laikā interesējošais gēns neintegrējas ar saimnieka genomu un īslaicīgi tiek īslaicīgi ekspresēts uzņēmējā, turpretī stabilas transfekcijas gadījumā interesējošais gēns integrējas saimnieka genomā un ilgstoši tiek uzturēts vairākās paaudzēs.s. Šī ir galvenā atšķirība starp īslaicīgu un stabilu transfekciju. Abos gadījumos transfekcija ir veiksmīga, un tiek izteikti gēni.

SATURS
1. Pārskats un galvenās atšķirības
2. Kas ir īslaicīga transfekcija
3. Kas ir stabila transfekcija
4. Salīdzinājums blakus - pārejoša vs stabila transfekcija
5. Kopsavilkums

Kas ir pārejoša transfekcija?

Transfekcija ir svarīgs līdzeklis gēnu ievietošanai eikariotu šūnās. Starp diviem transfekcijas veidiem īslaicīga transfekcija ir izplatīts gēnu pārneses veids. Caur vektoru svešās gēni tiek pārveidoti saimnieka šūnās. Tiklīdz sveša DNS nonāk saimnieka šūnā, tai ir divas iespējas. Tas var vai nu integrēties ar saimnieka genomu un replicēties, vai arī palikt iekšā, neintegrējoties genomā. Pārejoša transfekcija parāda ievietoto gēnu īslaicīgu ekspresiju, neintegrējoties saimnieka genomā. Gēni ekspresē un ražo kodēto olbaltumvielu, līdz šūna dalās. Tomēr integrācijas nespējas dēļ tā nevar atkārtoties un ienākt nākamajās paaudzēs. Šis transfekcijas veids ir veiksmīgs īsu laika periodu. Šūnu dalīšanās laikā vai dažu citu faktoru ietekmē svešā DNS tiek pakļauta noārdīšanai. Pārejoša transfekcija tiek parādīta, kad svešā DNS ir izteikti sagriezta DNS formā.

01. attēls. Pārejoša transfekcija

Kas ir stabila transfekcija?

Stabila transfekcija parāda veiksmīgu ārvalstu gēnu integrāciju saimnieka genomā. Tiklīdz sveša DNS nonāk saimniekorganisma šūnā, daļa svešas DNS integrējas saimnieka genomā un kļūst par tā daļu. Tādējādi arī svešās DNS replicējas un nonāk nākamajās paaudzēs, kad saimnieka genoms replicējas. Šis transfekcijas veids ir sarežģīts un reti sastopams. Tomēr, pateicoties stabilai transfekcijai genomā, šī īpašība tiek saglabāta ilgāku laiku, vairāku paaudžu laikā.

Stabila transfekcija ir grūts process, kas prasa efektīvu DNS piegādi un svešas DNS iegūšanu šūnās savā genomā. Tādējādi lineārā DNS veicina stabilu transfekciju nekā apļveida DNS. Tomēr stabils transfekcijas līmenis ir aptuveni viens no 10⁴ pārveidotās šūnas. Stabilu transfekciju var novērot, atlasot marķieri, veicot kopēju pārfrāzēšanu un mākslīgo atlasi veicot uz barotnes..

02. Attēls. Stabila transfekcija

Kāda ir atšķirība starp pārejošu un stabilu transfekciju?

Pārejoša vai stabila transfekcija
Svešas DNS neintegrējas saimnieka genomā.	Ārzemju DNS integrējas saimnieka genomā un kļūst par tā sastāvdaļu.
Replikācija resursdatorā
Pārejoši transfektēti gēni replicējas saimniekdatorā. Tāpēc gēni netiek nodoti nākamajām paaudzēm.	Gēni tiek replicēti saimniekdatorā un nodoti nākamajām paaudzēm.
Gēna ekspresijas laika ilgums
Gēni tiek izteikti ierobežotā laika posmā, un pēc tam tie tiek iznīcināti.	Gēni kļūst par genoma daļu un ilgstoši izpaužas paaudzē.
Izmantojiet
Tas ir noderīgi, lai izpētītu gēnu vai gēnu produktu īstermiņa ekspresijas ietekmi.	Tas ir noderīgi, lai izpētītu gēnu izpausmju ietekmi ilgtermiņā.
Transfekcijas noteikšana
Gēni tiek izteikti, un tos var viegli noteikt, ievietojot reportiera gēnu.	Stabilu transfekciju var viegli noteikt, ievietojot izvēles marķieri un atlasot, izmantojot mākslīgo atlasi barotnē.
Notikums un process
Pārejoša transfekcija ir izplatīta, un to nav sarežģīti veikt.	Stabila transfekcija ir reti sastopama, un to ir sarežģīti veikt.
DNS raksturs
Pārejošai transfekcijai ir piemēroti izteikti supervārīti DNS.	Lineāra DNS ir piemērota stabilai transfekcijai.
Lietojumprogrammas
To izmanto gēnu iznīcināšanas vai apklusināšanas pētījumiem ar inhibējošām RNS, olbaltumvielu ražošanai nelielā mērogā	To izmanto olbaltumvielu ražošanai plaša mēroga, ilgtermiņa farmakoloģijas pētījumos, gēnu terapijā, ilgtermiņa ģenētiskās regulēšanas mehānismu izpētē.

Kopsavilkums - pārejoša vs stabila transfekcija

Pārejoša un stabila transfekcija ir divu veidu transfekcijas, kas parādītas gēna pārnešanas laikā eikariotu šūnās, izmantojot nevis vīrusu balstītas sistēmas. Transformētā svešā DNS nav integrēta saimnieka genomā īslaicīgā transfekcijā, kamēr tā integrējas ar saimnieka genomu stabilā transfekcijā. Apļveidā ietītai DNS ir redzama īslaicīga transfekcija, turpretim lineārai DNS ir vēlama stabila transfekcija. Šī ir atšķirība starp pārejošu un stabilu transfekciju. Tomēr īslaicīga transfekcija ir biežāka un viegla, salīdzinot ar stabilu transfekciju. Bet viena izvēle no diviem ir atkarīga no gēnu pārnešanas mērķa un pētniecības projekta ilguma.

Atsauces:
1. Kondrijs, Dž. Patriks, Sems M. Witherspoon, William C. Clay un Thomas A. Kost. “Pārejoša un stabila gēna ekspresija zīdītāju šūnās, ko pārveido ar rekombinantā bakulovīrusa vektoru.” Amerikas Savienoto Valstu Nacionālās zinātņu akadēmijas raksti. Nacionālā zinātņu akadēmija, 1999. gada 5. janvāris. Web. 2017. gada 25. marts
2. Kims, Tae Kyungs un Džeimss H. Ebervīns. “Zīdītāju šūnu transfekcija: tagadne un nākotne.” Analītiskā un bioanalītiskā ķīmija. Springer-Verlag, 2010. gada augusts. Web. 2017. gada 25. marts