Atšķirība starp tiešo un netiešo imūno fluorescenci

galvenā atšķirība starp tiešu un netiešu imunofluorescenci ir tas, ka tiešajā imunofluorescencē tiek izmantota viena antiviela, kas darbojas pret interesējošo mērķi, savukārt netiešā imūnfluorescence izmanto divas antivielas, lai marķētu interesējošo mērķi.

Imunofluorescence vai šūnu attēlveidošana ir paņēmiens, ko izmanto, lai ar fluoroforu marķētu noteiktu mērķa antigēnu. Šeit fluorofors ir fluorescējošs ķīmisks savienojums, kas pēc gaismas ierosināšanas var atkārtoti izstarot gaismu. Kad fluorofors saistās ar mērķa antigēnu, tas ļauj noteikt mērķa molekulu paraugā. Lai aprakstītu to sīkāk, kad antigēns saistās ar noteiktu antivielu, to var konjugēt ar fluoroforiem. Tādējādi, novērojot ar fluorescences mikroskopu, paraugā ir viegli noteikt mērķa antigēnu..

Bez tam, pastāv divu veidu imunofluorescences veidi; tieša un netieša imunofluorescence. Atšķirība starp tiešo un netiešo imūno fluorescenci galvenokārt slēpjas izmantoto antivielu skaitā un fluoroforu konjugācijā. Tas ir, tiešā imunofluorescencē fluorofors tieši konjugējas ar primāro antivielu, bet netiešā imunofluorescencē - fluorofora konjugāts ar sekundāro antivielu.

SATURS

1. Pārskats un galvenās atšķirības
2. Kas ir tieša imunofluorescence
3. Kas ir netiešā imunofluorescence
4. Tiešās un netiešās imunofluorescences līdzības
5. Salīdzinājums blakus - tieša vai netieša imunofluorescence tabulas formā
6. Kopsavilkums

Kas ir tieša imunofluorescence?

Imūnfluorescence izmanto antivielas, lai noteiktu specifiskus mērķa antigēnus. Tieša imunofluorescence ir viens no diviem imūnfluorescences veidiem. Tiešā imunofluorescencē viena antiviela (primārā antiviela) iesaista un fluorofors tieši konjugējas ar primāro antivielu. Piesaistot antivielu ar mērķa antigēnu, fluorofors izstaro fluorescenci, ko var noteikt ar fluorescences mikroskopu.

01. attēls. Tieša imunofluorescence

Tomēr tieša imunofluorescence ir dārga metode, jo primārās konjugētās antivielas ir dārgas, salīdzinot ar sekundārajām antivielām. Tomēr tas nenozīmē papildu posmu, tātad īsāku paņēmienu. Turklāt nespecifiski saistījumi tiek samazināti tiešā imunofluorescencē. Tādējādi sugu savstarpēja reaktivitāte ir zema. Bet atklāšanā tiešās imunofluorescences jutība ir vāja, salīdzinot ar netiešo imunofluorescenci .

Kas ir netiešā imunofluorescence?

Netiešā imunofluorescence ir otrais imūnfluorescences veids, kas mērķa antigēna marķējumā ietver divu veidu antivielas, piemēram, primārās un sekundārās antivielas. Šajā metodē fluorofors konjugējas ar sekundāro antivielu. Tādējādi šis paņēmiens ietver papildu darbību.

02 attēls: imūnfluorescence

Tomēr jutība pret šo metodi ir augsta, jo vairākus fluoroforus var konjugēt ar sekundārajām antivielām, un tas atvieglo noteikšanu. Turklāt netiešā imunofluorescence ir lētāka tāpēc, ka sekundāro antivielu konjugācija ir lētāka un vienkāršāka. Salīdzinot ar tiešo imūnfluorescenci, netiešajā metodē sugu krusteniskā reaktivitāte ir augsta.

Kādas ir tiešās un netiešās imūnfluorescences līdzības?

• Tie ir divu veidu imunofluorescences paņēmieni.
• Abas metodes ietver primārās antivielas un fluoroforu.
• Arī antigēna-antivielas reakcija notiek abās metodēs.
• Turklāt gan tieša, gan netieša imunofluorescence antigēna noteikšanai izmanto fluorescences mikroskopu.

Kāda ir atšķirība starp tiešo un netiešo imunofluorescenci?

Imūnfluorescence var būt tieša vai netieša, pamatojoties uz fluoroforu konjugāciju ar izmantotajām antivielām. Tiešā imunofluorescencē fluorofors konjugējas ar primāro antivielu, kas ir vienīgā antiviela, kas iesaistīta šajā metodē. Pretstatā tam netiešā imunofluorescencē fluorofors konjugējas ar sekundāro antivielu, kas ir viens no diviem antivielu veidiem, kas iesaistīti šajā metodē. Tādējādi galvenā atšķirība starp tiešo un netiešo imunofluorescenci ir antivielu tips, kas konjugējas ar fluoroforu.

Šis infogrāfijas attēls salīdzina atšķirību starp tiešo un netiešo imūno fluorescenci.

Kopsavilkums - tieša vai netieša imūnfluorescence

Imūnfluorescence ir paņēmiens, ko izmanto, lai noteiktu specifisku antigēnu klātbūtni paraugā. Šajā tehnikā tiek izmantotas specifiskas antivielas. Tāpēc šajā antivielas konjugējas ar fluoroforiem, lai tās noteiktu, izmantojot dienasgaismas mikroskopu. Turklāt pastāv divi imūnfluorescences veidi, proti, tieša un netieša imūnfluorescence. Tiešā imunofluorescence ietver vienu antivielu un fluoroforu, kas tieši konjugēts ar šo antivielu. Netiešā imūnfluorescence ietver divas antivielas; primārais un sekundārais un fluorofors, kas konjugēts ar sekundāro antivielu. Tā kā vairākas sekundāras antivielas var saistīties ar primāro antivielu un vairāki fluorofori var konjugēties ar sekundārām antivielām, netiešā imunofluorescence ir jutīgāka metode nekā tiešā metode. Turklāt netiešā metode ir lētāka nekā tiešā metode. Tādējādi šī ir atšķirība starp tiešo un netiešo imūno fluorescenci.

Atsauce:

1. “Imunofluorescence”. Wikipedia, Wikimedia Foundation, 2018. gada 19. augusts. Pieejams šeit 

Attēla pieklājība:

1. “HSP IF IgA” Autors: Emanuels vietnē en.wikipedia, (CC BY 3.0), izmantojot Commons Wikimedia
2. “Imūnfluorescence” Autors: Westhayl618 - Savs darbs (CC BY-SA 4.0), izmantojot Commons Wikimedia