Audu kultūra ir metodika, ko izmanto, lai stimulētu šūnu augšanu, kuras ir atdalītas no organisma un tiek audzētas dažādās barotnēs. Audu kultūrā liela nozīme ir barotnei. Atkarībā no šūnu fizioloģiskajām un ķīmiskajām īpašībām dažādās kultūrās aug dažādas šūnas. Vienslāņu kultūra un suspensijas kultūra ir divi galvenie kultūru veidi, kurus izmanto audu kultūras procesā. Vienslāņu kultūra ir no stiprinājuma atkarīgs kultūra, kurā šūna aug, kamēr tā ir pievienota substrātam, un suspensijas kultūra ir stiprinājums neatkarīga kultūra, kurā šūnu agregātus izmanto šūnu kultūru izveidošanai šķidrā vidē. Tas ir galvenā atšķirība starp vienslāņu kultūru un suspensijas kultūru.
1. Pārskats un galvenās atšķirības
2. Kas ir vienslāņu kultūra
3. Kas ir balstiekārtas kultūra
4. Vienslāņa un balstiekārtas kultūras līdzības
5. Blakus salīdzinājums - vienslāņa un balstiekārtas kultūra tabulas formā
6. Kopsavilkums
Vienslāņu kultūru definē kā kultūras veidu, kurā šūnas kultivē vienā slānī kolbā vai Petri traukā, kurā ir barotne. Vienslāņu kultūru sauc arī par pielipušo kultūru vai no stiprināšanas atkarīgo kultūru. Iemesls, kas atsaucas uz pielipušo vai no enkurvietām atkarīgo kultūru, ir tāds, ka šīm šūnām augšanas laikā ir nepieciešams substrāts piestiprināšanai. Viņi pielīp pie šūnu kultūras, kas satur substrātu.
Substrāti, kas tiek izmantoti barotnē, pirms lietošanas jāuzlādē. Šie uzlādētie substrāti veicina šūnu mijiedarbību. Šo substrātu uzlādēšanai izmanto elektrisko jonu izlādes ierīci, divvērtīgus katjonu pārklājumus un gamma apstarošanu. Vienslāņu barotnē pēc šūnu inokulācijas augšanu regulē, izmantojot procesu, ko sauc par kontakta inhibīciju. Kontakta nomākšanas laikā šūnu augšana tiek apturēta, lai apturētu normālu šūnu proliferāciju, kad tās izveidoja monoslāni, kas piestiprināts pie virsmas.
01. attēls. Pievienotā kultūra
Šūnas, kuras piestiprināšanai ir atkarīgas no citiem substrātiem, sauc par pielipušajām šūnām. Šīs pielipušās šūnas bieži tiek iegūtas no orgānu audiem, piemēram, nierēm, utt. Šīs šūnas ir nekustīgas un parasti ir pievienotas saistaudiem. Tāpēc, audzējot šīs šūnas uz barotnes, ir jānorāda visi šie būtiskie augšanas faktori. Vienslāņu kultūras nozīme ir tāda, ka tā atdarina sākotnējos dabiskos apstākļus, lai šūna varētu pareizi nodibināties.
Suspensijas kultūru var definēt kā tādu kultūras veidu, kurā nelielu šūnu kopumu vai atsevišķu šūnu pavairošana notiek suspendētā šķidrumā, kas tiek nepārtraukti uzbudināts. Citiem vārdiem sakot, suspensijas kultūra ir pazīstama arī kā šūnu suspensijas kultūras šūnu kultūra. Šī kultūra palīdz izveidot vienšūnu kultūras, kuras varētu izmantot augu šūnu izpētē, ņemot vērā to atšķirīgo potenciālu un īpašības. Pētījumus par šo aspektu var izmantot, lai izprastu šūnu savstarpējo saistību un to ietekmi, kad runa ir par daudzšūnu organismiem.
Sākotnējā augu attīstības laikā veidojas kalluss, kas ir nediferencētu šūnu masa. Šis augšanas līmenis rada šķēršļus šūnu notikumu identificēšanai auga augšanas un attīstības fāzēs. Suspensijas kultūra tika ieviesta, lai pārvarētu šo situāciju, jo tā nodrošināja lielisku barotni vienšūnu kultūru izveidošanai no mazo šūnu agregātiem, kas iegūti no kallus. Tas tika izmantots, lai izpētītu dažādus morfoloģiskos un bioķīmiskos aspektus sākotnējos auga attīstības posmos.
02. Attēls. Suspensijas kultūra
Ideālas šūnu kultūras iegūšanas kontekstā tipiska metode ir sadrupinātās kallusa masas pārnešana uz samaisītā šķidrā barotnē, kur masa tiek sadalīta un viegli izkliedēta. Pēc tam lielos kauliņus izsijā, turot mazo šūnu agregātus un atsevišķus. šūnas. Tad šīs šūnas tiek pārnestas uz citu barotni. Aktīvi augošās šūnas iegūst pēc divām līdz trim nedēļām.
Vienslāņu vs balstiekārtas kultūra | |
Vienslāņu kultūra ir no stiprināšanas atkarīga kultūra, kurā šūnas tiek audzētas, kamēr tās ir pievienotas substrātam. | Suspensijas kultūra ir no stiprināšanas neatkarīga kultūra, kurā nelielu šūnu agregātu vai atsevišķu šūnu pavairošana notiek suspendētā šķidrumā, kas tiek uzbudināts. |
Prasības | |
Vienslāņu kultūrai nepieciešams trauks, kas apstrādāts ar audu kultūru, ar periodisku pasāžu. | Suspensijas kultūru var sasniegt ar traukiem, kas nav apstrādāti ar audiem. |
Izaugsmes ierobežojumi | |
Vienslāņu kultūras augšanu ierobežos virsmas laukums, kas tieši ietekmē ražu. | Suspensijas kultūras augšanas ierobežošanu nosaka šūnu koncentrācija barotnē. |
Šūnu disociācija | |
Šūnu disociācija notiek mehāniski vai fermentatīvi vienslāņu kultūrā. | Suspensijas kultūrai nav nepieciešama enzīmu palīdzība un mehāniski līdzekļi šūnu disociācijai. |
Šūnas vizualizācija | |
Vienslāņu kultūra ļauj viegli vizualizēt šūnas. | Suspensiju kultūrās ir grūtāk aplūkot šūnas. |
Funkcija | |
Vienslāņu kultūru izmanto citoloģijas, pētījumu un pastāvīgas produktu novākšanas jomās. | Suspensijas kultūru izmanto olbaltumvielu lielapjoma ražošanai, izpētes pētījumiem un partiju novākšanai. |
Vienslāņu kultūra un suspensijas kultūra ir divas galvenās kultūras, ko izmanto audu kultūrā. Vienslāņu kultūra ir no stiprināšanas atkarīga kultūra. Šūnas audzē šajā kultūrā, kur tās ir piesaistītas substrātam, kas atrodas kultūrā. Pirms lietošanas pamatnes tiek uzlādētas, iesaistot dažādus avotus, piemēram, divvērtīgus pārklājumus un jonu izlādes ierīci. Suspensijas kultūras ir no stiprināšanas neatkarīgas kultūras, kurās šūnas aug bez piestiprināšanas substrāta palīdzības. Šī kultūra palīdz izveidot vienšūnu kultūras, kuras varētu izmantot augu šūnu izpētē, ņemot vērā to atšķirīgo potenciālu un īpašības. Tā ir atšķirība starp vienslāņu kultūru un suspensijas kultūru.
1. “Šūnu suspensijas kultūra: definīcija, princips, protokols un nozīme | Augu audi. ” Bioloģijas diskusija, 2015. gada 26. oktobris. Pieejams šeit
2. “Adherentās un suspensijas šūnu kultūras.” Study.com, Study.com. Pieejams šeit
1.'Cellu kultūra PNIPAM'ā. Guillaume Paumier (lietotājs: guillom) - pašu darbs (CC BY-SA 3.0), izmantojot Commons Wikimedia
2.'Sphagnum palustre in Bioreactor'By ReskiLab (CC BY-SA 3.0), izmantojot Commons Wikimedia