Atšķirība starp papīra plāno slāni un kolonnu hromatogrāfiju

Galvenā atšķirība - papīrs vs plānslānis vs Sleja Hromatogrāfija
 

Papīra hromatogrāfija, plānslāņa hromatogrāfija un kolonnu hromatogrāfija ir trīs veidu hromatogrāfijas metodes. galvenā atšķirība starp papīra hromatogrāfiju, plānslāņa hromatogrāfiju un kolonnu hromatogrāfiju balstās uz stacionārās fāzes tipu, ko izmanto hromatogrāfijas tehnikā. Papīra hromatogrāfijā kā stacionārā fāze tiek izmantots celulozes papīrs, plānslāņa hromatogrāfijā kā stacionārā fāze tiek izmantots alumīnija oksīds vai silikagels, turpretī kolonnu hromatogrāfijā kā stacionārā fāze tiek izmantota kolonna, kas pildīta ar piemērotu matricas materiālu..

Biomolekulu, piemēram, olbaltumvielu un ogļhidrātu, atdalīšanas un identifikācijas procesā hromatogrāfija ir svarīgs izmantotais biofizikālais paņēmiens. Hromatogrāfija atdala savienojumus, pamatojoties uz to šķīdību, lielumu un lādiņu. Balstoties uz atdalīšanas mehānismu, hromatogrāfijā izmanto tādus mehānismus kā jonu apmaiņa, absorbcija, sadalīšanās un lieluma izslēgšana, un ir trīs hromatogrāfijas metodes; proti, papīra, plānslāņa un kolonnu hromatogrāfija. Papīra hromatogrāfijas pamatā ir savienojuma cietā un šķidruma adsorbcija un šķīdība, un kā stacionāru fāzi izmanto celulozes papīru. Plānslāņa hromatogrāfijas pamatā ir molekulu adsorbcija cietā un šķidruma veidā. Tam ir stacionāra fāze, kas parasti ir izgatavota no alumīnija oksīda vai silikagela, un mobilā fāze, kas ir šķīdinātājs. Kolonnu hromatogrāfijā izmanto kolonnu, kas pildīta ar matricu, kuru izmanto molekulu atdalīšanai, galvenokārt pamatojoties uz to lielumu, afinitāti vai tās lādiņu.

SATURS

1. Pārskats par hromatogrāfiju un galvenajām atšķirībām
2. Kas ir papīra hromatogrāfija
3. Kas ir plānslāņa hromatogrāfija
4. Kas ir kolonnu hromatogrāfija
5. Līdzības starp papīru, plānu kārtu un kolonnu hromatogrāfiju
6. Salīdzinājums blakus - papīra vs plānas kārtas un kolonnas hromatogrāfija tabulas formā
7. Kopsavilkums

Kas ir papīra hromatogrāfija?

Papīra hromatogrāfija ir vienkāršākais izmantotais hromatogrāfijas veids, un to neizmanto plašiem pētījumiem. To galvenokārt izmanto studentu laboratorijās, lai identificētu biomolekulas, piemēram, aminoskābes un ogļhidrātus, kas atrodas maisījumos. Papīra hromatogrāfijā izmanto stacionāru fāzi, kas tiek izgatavota, izmantojot celulozes papīru vai Whatman filtrpapīru, un mobilo fāzi, kuru parasti sagatavo, izmantojot organiskos šķīdinātājus, piemēram, n-butanolu utt. Stacionārā fāze ir piesātināta ar ūdeni, padarot stacionāru fāzi šķidru. Tādējādi, kad savienojumi ir plankumaini un tiem ļauj darboties kustīgās fāzes klātbūtnē, atkarībā no savienojumu šķīdības, tie tiek atdalīti. Tādējādi, izstrādājot hromatogrammu, var veikt krāsošanu, lai noteiktu katra savienojuma garumu. Tādējādi var aprēķināt aiztures koeficientu.

01. attēls. Papīra hromatogrāfija

Papīra hromatogrāfiju atkarībā no tekošā šķīdinātāja virziena var klasificēt kā augošā papīra hromatogrāfiju un dilstošā papīra hromatogrāfiju..

Kas ir plānslāņa hromatogrāfija?

Plānslāņa hromatogrāfija vai TLC ir parasti izmantots paņēmiens, lai identificētu dažādas aminoskābes, kas atrodas maisījumā, vai olbaltumvielu identificēšanai. Atdalīšanas tehnikas pamatā ir cietā šķidruma adsorbcija. Plānslāņa hromatogrāfijas laikā kā stacionāru fāzi izmanto plāksni, kas izgatavota no alumīnija oksīda vai silikagela. Šķīdinātāju maisījums mainās atkarībā no vajadzības, un šķīdinātāja pagatavošanai var izmantot dažādas organisko savienojumu kombinācijas, piemēram, n-butanolu, etiķskābi un ūdeni. Atdalāmos savienojumus plankumaina uz plāksnes un iegremdē šķīdinātāju maisījumā. Tiklīdz šķīdinātājs pārvietojas uz augšu, pamatojoties uz plāksnes radīto kapilāru darbību, arī uz plāksnes plankumainie savienojumi pārvietojas atkarībā no to šķīdības šķīdinātājā.

02. Attēls. Plānslāņa hromatogrāfija

Plankumu noteikšana pēc hromatogrammas tiek veikta, izmantojot dažādas krāsošanas procedūras. Daži izmanto ninhidrīna krāsošanu, kas ir diezgan toksiska krāsošanas metode. Mūsdienu plānslāņa hromatogrammās izmanto fluorescences paņēmienus, lai pēc apstrādes pārbaudītu hromatogrammu. Atkarībā no nobrauktajiem attālumiem var aprēķināt katra savienojuma aiztures laiku. To var izmantot, lai noteiktu savienojuma veidu, kas atdalīts, pamatojoties uz izmantoto maisījumu. TLC galvenokārt izmanto aminoskābju identificēšanai olbaltumvielu maisījumā un arī dažādu veidu monosaharīdu atdalīšanai maisījumā.

Kas ir kolonnu hromatogrāfija?

Kolonnu hromatogrāfija ir plašs termins, ko izmanto, lai aprakstītu daudzu veidu hromatogrāfijas metodes, kurās izmanto kolonnu atdalīšanas metodi. Kolonnu hromatogrāfijā savienojumu atdalīšanai izmanto fizikālo kolonnu ar iesaiņojuma materiālu. Atdalīšana var būt balstīta uz dažādām fizikālām īpašībām, kuras uzrāda savienojumi. Šīs īpašības var būt lādiņš, lielums, 3D formācija un saistošā spēja utt. Tādējādi kolonna, kas pildīta ar matricas materiālu, darbojas kā stacionārā fāze, un kolonnai uzliktais mazgāšanas buferis darbojas kā kustīgā fāze..

Ja molekulas tiek atdalītas, pamatojoties uz izmēru, iesaiņojuma materiāls tiek iesaiņots tā, lai savienojumi varētu iziet cauri porām. Tādējādi lielākās molekulas, kuras nevar izplūst cauri porām, vispirms tiek eluētas, turpretim mazākām molekulām eluācija prasa daudz ilgāku laiku.

03. attēls. Kolonnas hromatogrāfija

Ja molekulas tiek atdalītas, pamatojoties uz to lādiņu, stacionārā fāze saturēs vai nu anjonu vai katjonu apmaiņu, pie kuras savienojumi piesaistīsies, pamatojoties uz to lādiņu. Tādējādi mazgāšanas posmā nesaistītie savienojumi tiks eluēti. Pievienojot eluācijas buferi, saistītie lādētie savienojumi tiks eluēti. Šo eluentu noteikšana galvenokārt balstās uz spektrofotometriskām metodēm.

Kādas ir līdzības starp papīra plāno slāni un kolonnu hromatogrāfiju?

• Visu biomalekulu, piemēram, aminoskābju, olbaltumvielu un ogļhidrātu, atdalīšanai tiek izmantotas trīs papīra plānslāņu un kolonnu hromatogrāfijas metodes..
• Papīra plānslāņa un kolonnu hromatogrāfijas metodēm ir mobilā fāze un stacionārā fāze.
• Papīra plānslāņa un kolonnu hromatogrāfijas paņēmienos atdalīšanai izmanto biofizikālos mehānismus.

Kāda ir atšķirība starp papīra plāno slāni un kolonnu hromatogrāfiju?

Papīra un plānslāņa vs kolonnu hromatogrāfija
Papīra hromatogrāfija	Papīra hromatogrāfija ir hromatogrāfijas metode, ko izmanto savienojumu atdalīšanai, pamatojoties uz šķidruma-šķidruma adsorbciju un savienojuma šķīdību. Kā stacionāro fāzi tas izmanto celulozes papīru.
Plānslāņa hromatogrāfija	Plānslāņa hromatogrāfija ir vēl viena hromatogrāfijas metode, kuras pamatā ir molekulu adsorbcija cietā un šķidrā veidā. Tam ir stacionāra fāze, kas izgatavota no alumīnija oksīda vai silikagela, un kā kustīgā fāze ir šķīdinātājs, kas ir šķīdinātājs.
Kolonnu hromatogrāfija	Kolonnu hromatogrāfijā izmanto kolonnu, kas pildīta ar matricu, kuru izmanto molekulu atdalīšanai, galvenokārt pamatojoties uz to lielumu, afinitāti vai tās lādiņu.
Stacionārā fāze
Papīra hromatogrāfija	Papīrs, kas izgatavots no Whatman nitrocelulozes, tiek izmantots kā stacionārā fāze papīra hromatogrāfijā.
Plānslāņa hromatogrāfija	Plānās kārtas hromatogrāfijas stacionārajā fāzē izmanto alumīnija oksīdu vai silikagelu.
Kolonnu hromatogrāfija	Kolonnu hromatogrāfijā kā stacionāro fāzi izmanto kolonnu, kas ir iesaiņota ar piemērotu iepakojuma materiālu.
Mobilā fāze
Papīra hromatogrāfija	Darbīgais šķīdinātājs ir papīra hromatogrāfijas mobilā fāze.
Plānslāņa hromatogrāfija	Darbīgais šķīdinātājs ir plānslāņa hromatogrāfijas mobilā fāze.
Kolonnu hromatogrāfija	Mazgāšanas buferšķīdums ir kolonnas hromatogrāfijas mobilā fāze.
Atdalīšanai izmantotie mehānismi
Papīra hromatogrāfija	Papīra hromatogrāfijas pamatā ir cietā šķidruma absorbcija.
Plānslāņa hromatogrāfija	Plānslāņa hromatogrāfijas pamatā ir cietā šķidruma absorbcija.
Kolonnu hromatogrāfija	Kolonnu hromatogrāfijas pamatā ir lieluma izslēgšana, lādiņš un forma.
Eluācijas buferis
Papīra hromatogrāfija	Nav nepieciešama papīra hromatogrāfijā.
Plānslāņa hromatogrāfija	Nav nepieciešams plānslāņa hromatogrāfijai.
Kolonnu hromatogrāfija	Nepieciešams kolonnas hromatogrāfijā.
Noteikšana
Papīra hromatogrāfija	Krāsošana un nosakot aiztures koeficientu.
Plānslāņa hromatogrāfija	Krāsošana un nosakot aiztures koeficientu.
Kolonnu hromatogrāfija	Spektrofotometriskā noteikšana.

Kopsavilkums - Papīra plānais slānis vs Sleja Hromatogrāfija

Papīra hromatogrāfija, TLC un kolonnu hromatogrāfija ir atdalīšanas paņēmieni, ko izmanto, lai atdalītu biomolekulas, piemēram, olbaltumvielas, aminoskābes un ogļhidrātus (galvenokārt monosaharīdus). Papīra hromatogrāfijā kā stacionāru fāzi izmanto celulozes papīru, un atdalīšanas mehānisms ir balstīts uz cietā šķidruma adsorbciju. TLC izmanto arī cietā šķidruma adsorbcijas mehānismus. Stacionārā fāzē molekulas tiek atdalītas atkarībā no to šķīdības kustīgajā fāzē. Kolonnu hromatogrāfijā izmanto tādas fizikālās īpašības kā lielums, forma, lādiņš un savienojuma molekulmasa, lai tos atdalītu. Kolonna, kas pildīta ar matricas materiālu, darbojas kā stacionārā fāze, savukārt mazgāšanas buferis darbojas kā šķīdinātāja fāze. Tā ir atšķirība starp papīra plānslāņa un kolonnas hromatogrāfiju.

Atsauce:

1.Klarks, Džims. “Plāna slāņa hromatogrāfija.” Plāno slāņu hromatogrāfija, 2007. Pieejams šeit 
2.Koskuna, Ozlem. “Atdalīšanas paņēmieni: hromatogrāfija.” Stambulas Ziemeļu klīnikas, Kare Publishing, 2016. Pieejams šeit 

Attēla pieklājība:

1. “Hromatogrāfijas tvertne” (CC BY-SA 3.0), izmantojot Commons Wikimedia  
2.'Tlc secība'By Quantockgoblin (Public Domain), izmantojot Commons Wikimedia
3. 'Kolonnu hromatogrāfija' (publiskais īpašums), izmantojot Commons Wikimedia