Pētniecības joma ir nopietni pagriezusies pret šūnu kultivēšanas ieviešanu un šūnu līniju izmantošanu pētniecībā. Mākslīgi sagatavotām šūnām un šūnu līnijām tiek veikti dažādi testi, lai novērtētu šūnas izturēšanos. Lielākajai daļai cilvēku balstītu pētījumu ir nepieciešama šūnu kultivēšana un šūnu līnijas, lai apstiprinātu rezultātus, it īpaši, ja pētījumu pamatā ir farmakoloģija un zāļu atklāšana. Primārā šūnu kultūra ir kultūra, kas sagatavota, tieši izdalot šūnas ar mehāniskām vai fermentatīvām metodēm. Šūnu līnija tiek sagatavota, nepārtraukti izlaižot primāro šūnu kultūru, lai iegūtu šūnu līniju, kurai ir homoloģiskas rakstzīmes. galvenā atšķirība starp primāro šūnu kultūru un šūnu līniju ir katrai no tām piemītošo pārejas reižu skaits. Primārā šūnu kultūra ir tieši izolēta, turpretī šūnu līnija tiek sagatavota, vairākas reizes izlaižot primāro šūnu kultūru.
1. Pārskats un galvenās atšķirības
2. Kas ir primārā šūnu kultūra
3. Kas ir šūnu līnija
4. Primārās šūnu kultūras un šūnu līnijas līdzības
5. Salīdzinājums blakus - primārā šūnu kultūra pret šūnu līniju tabulas veidā
6. Kopsavilkums
Primārā šūnu kultūra ir šūnu kultūras preparāts, ar mehāniskām vai fermentatīvām metodēm izolējot šūnas tieši no avota. Šūnas tiek izolētas, izmantojot tripsinizācijas vai ne tripsinizācijas metodes. Primārās šūnu kultūras audzē piemērotā barotnē, kas satur augšanas faktorus, hormonus, lipīdus un citus nenoteiktus komponentus. Noteiktiem barotnēm jāpievieno serums. Barotnes nodrošina, ka tiek optimizēti augšanas apstākļi, un šūnas izdzīvo optimālos apstākļos. Šūnas var izolēt no dažādiem audu avotiem, piemēram, aknu audiem, endotēlija un neironu audiem cilvēkiem vai augstākiem dzīvniekiem, izmantojot tripsīnu.
Izolējot šūnas no augiem un mikroorganismiem, tiek izmantotas īpašas ekstrakcijas procedūras, kurās izmanto gan mehāniskās, gan ķīmiskās metodes. Šīs izolētās šūnas var tikt imobilizētas uz cieta atbalsta vai arī tās var pasāžēt vairākas paaudzes, lai tās attīstītos par šūnu līniju.
Primārās šūnu kultūras galvenokārt ir divu veidu; Pievienotās šūnu kultūras un suspensijas šūnu kultūras. Pievienotās primāro šūnu kultūras ir atkarīgas no stiprinājuma, un tām ir nepieciešams stingrs atbalsts augšanai. Piesaistītās primāro šūnu kultūras galvenokārt tiek iegūtas no audiem vai orgāniem. Suspensijas primāro šūnu kultūras ir neatkarīgas no enkurvietām, un tās aug šķidrā vidē. Suspensijas kultūras augšanas fāzē ir nepārtraukti jāsamaisa. Suspensijas primāro šūnu kultūras var tieši iegūt asinīs.
Primāro šūnu kultūru dzīves ilgums ir salīdzinoši mazāks, bet informācija, kas iegūta no primāro šūnu kultūrām saskaņā ar in vitro apstākļi nodrošina daudzu studiju pamatus. Tie ir noderīgi, lai izpētītu šūnu īpašības, gan morfoloģisko, gan ķīmisko uzvedību.
Šūnu līnijas tiek plaši izmantotas pētniecībā, un šobrīd tādu šūnu līnijas kā vēža šūnu līnijas, aknu šūnu līnijas un nieru šūnu līnijas ir komerciāli pieejamas pētījumu mērķiem. Šūnu līnijas sagatavo, nepārtraukti izdalot primāro šūnu kultūru. Pasāža attiecas uz subkultūras procesu, kurā šūnu kultūras tiek pārveidotas par šūnu līniju. Šīs šūnu līnijas ir kultūras divdimensiju vai trīsdimensiju matricās un tiek uzturētas kā šūnu līnijas.
Šūnu līnijas klasificē kā ierobežotas un nepārtrauktas šūnu līnijas. Galīgās šūnu līnijas tiek pakļauti noteiktam fragmentu skaitam (20 - 30 fragmenti). Pabeidzot vajadzīgo eju skaitu, šūnu līnija nonāk novecošanās stadijā. Šīs šūnas ir viegli apstrādājamas, jo to augšana ir noteikta. nepārtrauktas šūnu līnijas tiek saukti arī par iemūžinātas šūnu līnijas. Šīm šūnu līnijām nav noteikta skaita eju. Viņi aug bezgalīgi un tādējādi spēj iegūt mutācijas. Tāpēc nepārtrauktas šūnu līnijas ir viegli mutētas un tādējādi mainās to morfoloģiskās un ģenētiskās īpašības atšķirībā no ierobežotajām šūnu līnijām.
01. attēls: šūnu līnija
Šūnu līnijas tiek izmantotas, jo tas ir ērtāk, nekā izmantot primāro šūnu kultūru, jo tās var izmantot atkal un atkal noteiktu laiku. Bet tas ir vairāk pakļauts mutācijām un piesārņojumiem, jo to izplatība ir palielinājusies.
Primārā šūnu kultūra pret šūnu līniju | |
Primārā šūnu kultūra ir kultūra, kas sagatavota, tieši atdalot šūnas ar mehāniskām vai fermentatīvām metodēm. | Šūnu līnija tiek sagatavota, nepārtraukti izlaižot primāro šūnu kultūru, lai iegūtu šūnu līniju, kurai ir homoloģiskas rakstzīmes. |
Eju skaits | |
Primārās šūnu kultūras netiek pasētas, šūnas tiek uzturētas audzēšanas apstākļos. | Veicot šūnu līnijas, šūnas tiek caurspīdīgas noteikti vai uz nenoteiktu laiku. |
Veidi | |
Adherentā primāro šūnu kultūra un suspensijas primāro šūnu kultūra ir divu veidu primāro šūnu kultūras. | Ierobežota šūnu līnija un nepārtraukta šūnu līnija ir divu veidu šūnu līnijas. |
Mūžs | |
Primāro šūnu kultūrām ir īss mūžs. | Šūnu līnijas kalpo ilgāk. |
Primārās šūnu kultūras un šūnu līnijas tiek plaši izmantotas pētījumos, lai izpētītu dažādu šūnu uzvedības modeļus dažādos apstākļos un dažādos farmakoloģiskos aspektos. Primārās šūnu kultūras tiek tieši izolētas no avota orgāna vai audiem un audzētas uz barotnes. Apstākļi ir optimizēti specifisko šūnu augšanai. Šūnu līnijas turpretī tiek sagatavotas, sākotnējās šūnu kultūras pasniedzot ierobežotu vai bezgalīgu reižu. Šūnu līnijas ir nopērkamas un pētnieku vidū iecienītas lietošanas ērtuma dēļ.
1.Lonza, Primārās šūnas pret šūnu līnijām. Pieejams šeit
1. “Cilvēka šūnu līnijas kolonija tiek klonēta in vitro, izmantojot klonēšanas gredzenus” Autors: Paphrag (CC BY-SA 2.5), izmantojot Commons Wikimedia