Atšķirība starp apgrieztās un normālās fāzes HPLC

galvenā atšķirība starp apgrieztās un normālās fāzes HPLC ir tāda, ka reversās fāzes HPLC izmanto polāro stacionāro fāzi un mazāk polāro mobilo fāzi, turpretī normālas fāzes HPLC izmanto nepolāru stacionāro fāzi un polāro mobilo fāzi.

Normālās fāzes HPLC ir vecākā HPLC metode, kuru Tswett izmantoja, veicot augu ekstraktu atdalīšanu; stikla kolonnā viņš izmantoja krītu. Tas bija klasiskais hromatogrāfijas veids, kā rezultātā to nosauca par “parasto” paņēmienu. Savukārt apgrieztās fāzes HPLC ir pretējs normālajam paņēmienam, kuru zinātnieki izstrādāja nesen.

SATURS

1. Pārskats un galvenās atšķirības
2. Kas ir apgrieztās fāzes HPLC
3. Kas ir normālās fāzes HPLC
4. Salīdzinājums blakus - reversās fāzes un normālās fāzes HPLC tabulas veidā
5. Kopsavilkums

Kas ir apgrieztās fāzes HPLC?

Reversās fāzes HPLC ir hromatogrāfijas metode, kurā mēs izmantojam hidrofobisku stacionāru fāzi. Starp visām HPLC metodēm mēs izmantojam šo metodi aptuveni 70%, ņemot vērā tās plašo pielietojamību un reproducējamību. Stacionārā fāze ir nepolāra, un mobilā fāze ir polāra.

Lielākoties zinātnieki kā kustīgo fāzi izmanto ūdens ūdens maisījumu ar viegli samaisāmu, polāru organisko šķīdinātāju, piemēram, acetonitrilu vai metanolu. Tāpēc analizējamie mijiedarbojas ar nepolāro stacionāro fāzi.

Kas ir normālās fāzes HPLC?

Parastās fāzes HPLC ir hromatogrāfijas metode, kurā mēs izmantojam hidrofīlu stacionāru fāzi. Tā ir tradicionālā HPLC metode, kaut arī to neizmantojam tik daudz. Stacionārā fāze ir polāra, un mobilā fāze ir nepolāra. Vēl svarīgāk ir tas, ka šīs tehnikas mobilā fāze ir 100% organiska. Tas nozīmē, ka šim nolūkam netiek izmantots ūdens.

01. attēls. Parauga profils normālās fāzes un reversās fāzes HPLC hromatogrammām atbilstoši analizējamā komponenta polaritātei.

Parasti stacionārajā fāzē ir silīcija dioksīds, ciano, diols, ar aminiem saistītas fāzes utt. Mobilās fāzes ietver organiskos šķīdinātājus, piemēram, heksānu, etilacetātu utt. Šī metode balstās uz šķīdinātāja vai analīta molekulu aizturi polārajā stacionārajā fāzē..

Kāda ir atšķirība starp apgrieztās un normālās fāzes HPLC?

Reversās fāzes HPLC ir hromatogrāfijas metode, kurā mēs izmantojam hidrofobisku stacionāru fāzi. Šīs tehnikas stacionārā fāze ir nepolāra. Stacionārā fāze ir nepolāra, bet mobilā fāze ir polāra. Turklāt zinātnieki apgrieztā fāzes HPLC mobilajā fāzē izmanto ūdens ūdens maisījumu ar viegli sajaucamu, polāru organisku šķīdinātāju, piemēram, acetonitrilu vai metanolu. Tā kā normālās fāzes HPLC ir hromatogrāfijas metode, kurā mēs izmantojam hidrofilu stacionāru fāzi. Šīs tehnikas stacionārā fāze ir polāra. Stacionārā fāze ir polāra, kamēr mobilā fāze ir nepolāra. Bez tam zinātnieki kā normālas fāzes HPLC mobilo fāzi izmanto organiskos šķīdinātājus, piemēram, heksānu, etilacetātu utt. Zemāk esošajā infografikā tabulas veidā ir parādīta atšķirība starp reversās fāzes un normālās fāzes HPLC.

Kopsavilkums - apgrieztās fāzes un normālās fāzes HPLC

Reversās fāzes un normālās fāzes HPLC metodes ir divas šķidruma hromatogrāfijas metodes. Atšķirība starp reversās fāzes un normālās fāzes HPLC ir tāda, ka reversās fāzes HPLC izmanto polāro stacionāro fāzi un mazāk polāro mobilo fāzi, turpretī normālās fāzes HPLC izmanto nepolāro stacionāro fāzi un polāro mobilo fāzi..

Atsauce:

1. Ūdeņi. “HPLC atdalīšanas režīmi.” HPLC - augstas izšķirtspējas šķidruma hromatogrāfijas skaidrojums: ūdeņi. Pieejams šeit